99久久精品全部-99久久精品免费看国产一区二区三区-99久久精品免费看国产免费-99久久精品免费精品国产-伊人91-伊人888

您好!歡迎訪問和元李記(上海)生物技術有限公司網站!
咨詢熱線

18616108315

當前位置:首頁 > 新聞中心 > 蛋白酶K的使用方法

蛋白酶K的使用方法

更新時間:2019-05-28      點擊次數:1413
     蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩定,還具有降解天然蛋白質的能力,因而它應用很廣泛,包括制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(pH4-12.5)均有活性。
  推薦反應緩沖液:50mMTris-HCl(pH7.5),10mMCaCl2。
  蛋白酶K配制標準:20mg/ml蛋白酶K配制標準(proteinaseK):將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,輕輕搖動,直至蛋白酶K*溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然后分裝成小份貯存于-20℃。
  蛋白酶K的保存:保存在-20℃冰箱里,避免反復凍融,有效保證12月。
  孵育溫度為55至65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時間為15分鐘至48小時;理想孵育時間為2小時。
  作用:蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質的作用,以增加探針與靶核酸結合的機會,提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時,都會對細胞的結構有一定的破壞,導致組織切片的脫落,細胞核的消失,從而影響雜交結果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用,解決上述出現的問題,并能達到理想的染色效果。
  蛋白酶K的應用比較廣泛,它可以消化包圍靶DNA蛋白,因此使用蛋白酶K能夠增加探針與靶核酸結合的機會增強雜交信號,但在使用蛋白酶K時要主要使用的濃度,過高或者過低都會破壞細胞的結構、核消失等影響試驗結果。
微信咨詢
地址:上海市浦東新區紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2024 和元李記(上海)生物技術有限公司 版權所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備2023007219號-1
主站蜘蛛池模板: 日韩影音| 欧美日韩亚洲无线码在线观看| 国产视频首页| 欧美亚洲综合在线| 国内精品久久久久激情影院| 国产精品亚洲欧美一级久久精品| 中文字幕在线不卡| 在线亚洲激情| 久久久一本| 特黄一级毛片| 中文字幕日本一本二本三区| 亚洲欧美综合| 国产一级特黄a大片99| 极品美女户外勾搭无套| 国产日韩欧美精品一区二区三区| 日韩小视频在线观看| 99国产牛牛视频在线网站| 亚洲欧美综合视频| 欧美一区二区三区在线视频| 国产在线精品一区二区夜色| 久久久国产99久久国产久| 美国一级大黄大色毛片视频一| 欧美色图日韩色图| 久久久久久综合一区中文字幕| 免费爱爱视频网站| 劲爆欧美精品13页| 国产网站在线免费观看| 一区二区视频在线观看| 欧美v日韩v亚洲v最新| 亚洲一区二区久久| 亚洲精品午夜国产va久久成人| 欧美高清a| 拍真实国产伦偷精品| 在线 v亚洲 v欧美v 专区| 99视频免费看| 影音先锋在线视频| 欧美性野久久久久久久久| 日本一区二区三区视频在线观看| 免费国产黄网站在线观看视频| 国产中文久久精品| 精品亚洲一区二区三区|